利用基因敲除验证提高研究可重复性
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欢迎参加由 Abcam 首席质量控制科学家 Hanna Dreja 博士主讲的网络研讨会，Hanna Dreja 博士将讨论如何使用基因敲除细胞系来提高验证标准并为整个生命科学行业的研究可重复性提供支持。
网络研讨会目标：
- 了解基因敲除细胞系作为技术验证工具以及在解决关键生物学问题方面的优势
- 了解专家对基因敲除细胞系在基础研究、靶点发现以及药物基因组学方面应用的看法
- 了解 Abcam 如何克服使用基因敲除细胞系工作过程中的常见问题
我们的 CRISPR 专家还解答了网络研讨会期间提出的一些其他问题，具体如下。
- 能否通过流式细胞术和 RNA 检测确认细胞表面蛋白的 CRISPR 基因敲除是否成功？
CRISPR KO 是在靶基因序列中插入或删除核苷酸，这样会导致基因序列发生移码突变，促使翻译机制遇到提前终止密码子，从而阻止完全蛋白的表达。因此，最终会出现被降解的微小蛋白质。
由于细胞检测到蛋白未完全翻译，产生的 mRNA 就会发生无义介导的降解。但是，该过程并非 100% 有效1。
如果您对您的抗体有信心，建议您使用蛋白质检测来确定蛋白是否真正被敲除。
- 如何通过抗体确认 CRISPR 基因敲除？
要想证明抗体与目标蛋白发生了特异性结合，需要使用阴性对照，即不含该蛋白的对照样本。如果您有正常表达该蛋白的细胞系，并且对该细胞系进行了基因修饰，使其不再表达该蛋白，那么您就拥有了两种完全匹配的样本：阳性和阴性对照样本。如果您的抗体具有特异性，在基因敲除样本中应该检测不到信号。
主讲人简介：
Hanna Dreja 拥有英国皇家学院（伦敦）博士学位，并在法国蒙彼利埃分子遗传学研究所、伦敦玛丽王后大学和剑桥大学等多家学术机构完成博士后研究。科研经验丰富，主攻抗体与传染性病原体。
作为 Abcam 科学质量控制团队的负责人，Hanna Dreja 博士的使命是为客户提供超出期望的产品，帮助他们以更快的速度研发更多的产品。基因敲除计划是近期团队成功的基石，并于 2016 年和 2020 年荣获 CiteAb 奖。
参考文献
About the presenter:
Hanna Dreja received a PhD from Imperial College (London) and completed postdoctoral research at several academic institutes (Institut de Génétique Moléculaire de Montpellier (France), Queen Mary’s University (London) and the University of Cambridge). She has developed a broad scientific skill base with a strong focus on antibodies and infectious agents.
As a team leader of the Scientific Quality Control team at Abcam, her mission is to provide products that exceed our customers' high expectations - helping them to discover more, faster. The knockout initiative has been a cornerstone of the recent team successes and was recognized in the prestigious CiteAb award in 2016 and 2020.