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IRDye® 偶联二抗

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对比使用HRP二抗的化学发光 (ECL),了解使用IRDye® 偶联二抗的红外荧光WB的优势,包括同时检测多个蛋白的能力。

  

红外荧光WB对比化学发光的优势

IRDye® 二抗的优势:同时使用 IRDye® 800CW 和 IRDye® 680RD 二抗可适用于在同一膜上检测到多个蛋白和处理多张膜的情况。使用IRDye®二级抗体,并按我们的优化荧光免疫印迹实验方案,就可检测您感兴趣的蛋白质。

    


化学发光

红外荧光

优点

多重染色

不能

红外WB无需对膜进行strip和重新标记即可进行归一化或对比分析

检测

间接

(酶促反应)

直接(荧光)

使用 IRDye® 二抗,信号与目标蛋白量直接成正比,而在化学发光中酶/底物反应可能会产生影响。​​

稳定性

数小时

数月至数年

IRDye® 荧光信号高度稳定,因此可以储存膜然后再次成像。

灵敏度

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红外检测比其它荧光方法的灵敏度更高,与化学发光的灵敏度相当。

时间

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IRDye® 二抗的动态范围宽,减少了多次曝光的需要从而节省您的时间

二抗

HRP AP 偶联二抗

 IRDye® 偶联二抗


获取 IRDye® 二抗


举例: 针对内参的归一化。​

在同一膜上对内参进行归一化,无需strip和重新标记。使用IRDye®二级抗体的荧光免疫印迹复合免疫印迹也允许灵敏和定量检测蛋白质。

图 1. 通过红外荧光WB进行 P53 分析。使用 p53 的抗体 [DO-1] (ab1101) 作为一抗,山羊抗小鼠 IgG H&L (IRDye® 800CW) (ab216772) 作为二抗。泳道 1 :野生型 HAP1 细胞裂解物,泳道 2 :p53 敲除的 HAP1 细胞裂解物,泳道 3 :A431 细胞裂解物,泳道 4 :Saos-2 细胞裂解物


检测

一抗

二抗

IRDye® 800CW

目标蛋白

Anti-p53 抗体 [DO-1] (ab1101)

山羊抗小鼠 IGG H&L (IRDye® 800CW)-ab216772

IRDye® 680RD

管家基因(内参)

Anti-GAPDH 抗体[EPR16891] (ab181602)

山羊抗兔 IGG H&L (IRDye® 680RD)- ab216777


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