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石蜡包埋的组织切片视频方案

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                  将组织包埋到石蜡块中支持组织结构,确保组织能够切成非常薄的切片,并置于显微镜载玻片上进行分析。本方案描述了如何对石蜡包埋组织进行切片。


                  ​查看其他相关视频,请访问我们的视频库。
                  ​

                  ​材料与试剂

                  • 水浴锅
                  • 加冰容器
                  • 玻璃显微镜载玻片
                  • 薄片切片机和刀片
                  • 烘箱

                  切片

                  1. 切片前在冰上冷却石蜡包埋的组织块。冷蜡可为组织标本内较硬的成分提供支撑,以此获得较薄的切片。从融冰中渗入组织块的少量水分也会使组织更容易切割。

                  2. 在水浴槽中注入超纯水,加热至 40℃ 至 45℃。

                  3. 将刀片放入固定卡槽中,确保其被牢固固定,并设置间隙角。间隙角防止刀片面与石蜡块表面接触。按照切片机生产商的说明书设置间隙角。对于 Leica 刀片,角度通常介于 1° 和 5° 之间(图 1)。

                  4. 插入石蜡块并定位,以便切片时刀片可以垂直穿过组织块。

                  5. 小心地用刀片接近组织块并切几个薄片,以确保定位正确。必要时进行调整。

                  6. 修剪蜡块,暴露组织表面,以获取有代表性的组织切片表面。修剪通常在 10 至 30 μm 的厚度范围内进行。

                  7. 切片厚度大约为 4 至 5 μm(您可能需要丢弃前几个切片,因为其可能含有因修剪而造成的孔洞)。

                  8. 用镊子拾起连续切片,使其浮在水浴槽的水面上,并展平。用镊子分离切片。

                  9. 用显微镜载玻片从水浴槽中捞出切片,并将其直立存放在玻片架中。

                  10. 将玻片架放入烘箱中,使切片在 37℃ 下干燥过夜。

                  图 1: 刀片间隙角。 刀片的间隙角防止刀片面与石蜡块表面接触。应调整刀片间隙角,以实现最佳性能。​

                  现在阅读我们的石蜡包埋切片 IHC 方案。

                  打印此方案

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