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关于抗体的应用方法与技术概述
酶联免疫吸附实验 (ELISA)
ELISA的实验原理是基于抗体/抗原的特异性结合,它不仅能够对特定的蛋白进行定量分析,还可以研究分子之间的相互作用或其他特性。
将针对靶标的抗体与检测酶偶联。在加入底物时,这种酶催化底物生成有色产物。通过分光光度计的测定,便可以知道样品中抗原的浓度。
每一个ELISA实验都需要考虑许多因素,包括预期的灵敏度、特异性和实验时间。我们的SimpleStep ELISA™ 试剂盒和标准ELISA试剂盒成本相同,但实验时间却可以减半,而且不会影响灵敏度或可靠性。
ELISA介绍及疑难解答网络研讨会
ELISA资源
ELISA试剂盒
SimpleStep ELISA™ 试剂盒
ELISA 疑难解答提示
In-Cell ELISA 网络研讨会介绍
WB通常被用来确定样品间蛋白的相对表达水平,还可以确定目标蛋白的分子量大小,这有利于我们对蛋白的翻译后修饰过程进行研究。
根据分子量大小的不同,组织或细胞裂解液中的蛋白通过凝胶电泳得以分离。接着,分离的蛋白被转移到膜上,随后用抗体来检测感兴趣的蛋白。
WB权威指南
WB疑难解答提示
HRP检测试剂盒
HRP偶联物
荧光WB网络研讨会
IHC揭示了样本内抗原的组织特异性和亚细胞定位。相比与WB和ELISA,它的定量分析应用较少,但是在完整组织中对于蛋白表达的分析更有优势 。
IHC染色是通过抗体识别靶蛋白实现的。抗原抗体复合物能够通过酶促反应或者荧光来实现可视化。这些底物可以直接偶联到一抗或二抗上。
现在有各种各样的样品制备和可视化技术,而所使用的方法根据正在研究的标本类型和灵敏度需求进行调整。
高度验证的抗体偶联物
优化您的IHC和ICC结果,免费网络研讨会
免疫组织化学网络研讨会介绍
IHC实验方案
ICC通常使用荧光标记的抗体来研究蛋白的亚细胞分布。与IHC相比,该技术提供了更高的空间分辨率,因为培养的细胞不会有组织样本的复杂环境。
在已经固定并通透处理的细胞培养样本中,抗体和靶蛋白特异性结合,再通过与一抗直接偶联的荧光素或荧光二抗,使其可视化。用荧光显微镜即可对结果信号进行观察。多个靶标可以使用不同荧光标记的一抗同时进行研究。
流式细胞术是测量细胞某些化学和物理特性的一种手段。参数测量包括细胞大小和细胞表面以及细胞内标记物的表达量。
流式细胞仪测量被标记抗体的荧光。细胞分选(FACS)是一种更复杂的系统,它能量化荧光信号,并将细胞以预先选定的特征(如荧光强度、大小和生存能力),从混合细胞群中分离出来。
高度验证的抗体偶联物
流式细胞术网络研讨会介绍
流式细胞术多色分选
免疫沉淀是分离纯化单一或复合蛋白的最常用的一种方式。
抗体被固定在固相基质(如磁珠/琼脂糖小球)上,从而从复杂溶液中捕获抗原。
染色质免疫沉淀(ChIP) 技术用来确定特定蛋白是否与体内特定DNA序列相互作用。
IP抗体
免疫沉淀:步骤,误区和实验方案提示网络研讨会
染色质免疫沉淀:ChIP 详情介绍网络研讨会
ELISPOT用于检测如细胞因子和生长因子这样的分泌蛋白。该技术可以量化和对比各种刺激下的免疫反应。
在96孔板中,细胞生长在带有抗体包被的PVDF膜或硝化纤维素膜上,分泌蛋白会与抗体结合。抗体-抗原间的相互作用可以通过二抗进行检测,使得分泌蛋白的亲本细胞呈现特定的颜色(一个点=1个细胞)。对膜进行扫描和分析,以定量分泌蛋白的细胞的数量/百分比。
酶联免疫斑点实验(ELISPOT)和荧光免疫斑点实验(FLUOROSPOT)
酶联免疫斑点实验(ELISPOT)实验方案
酶联免疫斑点实验(ELISPOT)疑难解答提示
酶联免疫斑点实验(ELISPOT)产品