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2023 年 6 月 2 日更新
我们将抗体基因克隆到高产率表达载体中并将这些载体引入宿主,从而获得重组抗体。
重组抗体克服了其他抗体生产方法的局限性。这种方法不受可重复性低和遗传漂变(会导致最终抗体的变异)的限制,还使靶向高难度靶点如毒素、核苷酸和膜结合蛋白成为可能。
我们的重组抗体具备多项优势,包括批间一致性高、特异性确认、量产容易,可以加快您的研究。
我们的重组抗体:
由于重组抗体是使用一组独特的基因表达形成的,因此它的生产是可控且可靠的。重组抗体的批间一致性非常高,这也意味着您可以得到高可重复性结果并加速推进您的项目。
图 1. 5 个批次的 PD-L1 [28-8] 重组兔单抗 (ab205921) 在 FFPE 人胎盘中定位 PD-L1 的批间可重复性。IHC为手动染色, 使用了 Biocare Decloaking 设备和通用 HIER 抗原修复试剂 (ab208572)。将一抗置于 4°C 下孵育过夜,随后用山羊抗兔二抗和 HRP 偶联抗山羊聚合物抗体 (ab209101) 进行孵育。用 DAB 染色,并用苏木精复染。
KD 值是抗体亲和力的定量检测值。KD 值越低,抗体亲和力越高。我们的 PDL1 重组抗体的 KD 值分析结果表明,5 个不同批次抗体的亲和力都很高(表 1)。
表 1. 5 个不同批次的 PD-L1 重组抗体 [28-8] (ab205921) 的 KD 值分析。如需了解有关 KD 值的更多信息,请查看我们的 KD 指南。
抗体 | KD (M) |
PD-L1_批次 1 | 4.74E-11 |
PD-L1_批次 2 | 3.83E-11 |
PD-L1_批次 3 | 2.04E-11 |
PD-L1_批次 4 | 2.40E-11 |
PD-L1_批次 5 | 2.13E-11 |
为了确保特异性,我们采用行业领先方法对重组抗体进行了验证。超 3,800 种重组抗体经基因敲除验证,确保您能更快推进研究。
此外,由于在杂交瘤和重组克隆阶段我们都会对所需克隆进行筛选,所以能够选出最优质的抗体。
我们的重组抗体亲和力极高,它们的 KD 值均在皮摩尔(10-10–10-12)范围内。与低亲和力抗体相比,高亲和力抗体在检测中的灵敏度更高,因为它们能够与抗原牢固结合并且能够在困难条件下更好地维持这种结合。
以下实例展示了重组抗体和其他类型抗体之间的特异性差异。
图 2. GRIM19 重组抗体 [EPR4471(2)] (左)与 GRIM19 [6E1BH7] 单克隆抗体在基因敲除样本和野生型样本上的检测结果对比。
量产容易、可长期供应
生产重组抗体时,需要将抗体基因克隆到表达载体中。这意味着重组抗体可以实现任何规模的表达,并且保证长期供应,让您更加安心地持续开展各种规模的项目研究。因此,重组抗体是长期研究以及在多个样本中使用相同抗体的研究的绝佳解决方案。
一旦分离出表达抗体的基因,就可以实现高通量体外生产。对于产自噬菌体展示技术的抗体,其基因也可以使用无动物程序分离。
重组抗体可以制备成单克隆抗体(monoclonal antibodies),也可以制备成多克隆抗体(multiclonal antibodies)。重组单克隆抗体由相同的抗体链组成,靶向相同的表位。这些相同的抗体链不仅可以提高可重复性,保障供应,而且可以提高灵敏度,保证特异性。
重组多克隆抗体是精心挑选的单个重组单克隆抗体的限定混合物,旨在识别同一抗原上的不同表位。重组多克隆抗体非常适合习惯使用多克隆抗体(polyclonal antibody)的应用,他们具备与重组单克隆抗体同样的特异性和可重复性优势。
制备重组多克隆抗体的抗体混合物是可控的;混合物中包含的每种重组单克隆抗体均采用能够编码具备预期特征的抗体的特定基因组合进行开发。这样可以确保批间一致性和结果的可重复性。
由于重组多克隆抗体可以与同一靶蛋白上的多个抗原表位结合,因此灵敏度十分出色;如果您需要一种能够分析低丰度靶点或者一次性检测多个翻译后修饰的试剂,重组多克隆抗体非常合适。
下方图 3 和图 4 比较了多克隆抗体和重组多克隆抗体对靶点 CD133、histone H3(citrulline R2 + R8 + R17)和 GFAP 的灵敏度。
“首次试用这种抗体,就得到了强阳性信号,并且几个月以来实验结果可重复性表现出色。”– 来自伦敦大学学院奥蒙德街儿童健康研究所的 Gabriel Galea 使用 ab179484 后表示。
“abcam 的 Synaptophysin 抗体第一次试用结果就很好。我们能够使用共聚焦激光扫描生成出色的图像,而且背景极低。”– 来自米纳斯吉拉斯联邦大学 (UFMG) 的 Alexandre Magno 使用 ab32127 后表示。
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