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The RabMAb story

RabMAb®:更优质的兔单克隆抗体

RabMAb 是 Abcam 针对高特异性、高灵敏度单克隆抗体开发的专利技术。

需求

兔免疫系统非常复杂,拥有基因转换和体细胞高频突变两种机制,可产生高灵敏度的抗体。另外,兔免疫系统具有出色的抗原识别能力,因此可以产生小鼠难以产生的抗体(12)。

人们早在 20 年前就已对兔单克隆抗体有着极高的需求,因为多克隆抗体在信号质量上有着明显的缺点(即非特异性和高背景)。而单克隆抗体可提供独一无二的抗原表位识别能力和批次间一致性,且可持续性供应。

随着科学界和医疗行业对更高灵敏度和更高特异性抗体的需求日益增长,兔单克隆抗体成为了解决问题的关键。

— Weimin Zhu,Abcam RabMAb® 技术的共同发明人

尝试

将骨髓瘤细胞与小鼠脾脏细胞相融合的小鼠杂交瘤技术被开发出来后,人们为生成兔单克隆抗体进行了许多尝试 (3)。

人们的首次尝试是针对小鼠-兔杂交瘤,由于此类杂交瘤难以克隆、不稳定且生产源有限,因此效果不甚理想。 (4). 

1995 年,芝加哥洛约拉大学的 Katherine Knight 及其同事成功培育出可过度表达致癌基因 v-abl 和 c-myc 的双转基因兔,兔体内会形成与骨髓瘤类似的肿瘤,并且该过程顺利分离出浆细胞瘤细胞系(称为 240E-1),使之成为产生兔单克隆抗体的首个融合伴侣细胞。

240E-1 细胞与兔淋巴细胞的融合产生的杂交瘤会以一致的方式分泌兔单克隆抗体,但是融合伴侣细胞的稳定性还是问题 (5)。

突破

1996 年,加州大学旧金山分校的 Weimin Zhu 和 Robert Pytela​ 从 Knight 博士的实验室获得了 240E-1,并进一步发展了这项技术 (6)。

研究人员对 240E-1 细胞进行反复亚克隆和筛选,以改良融合细胞系的特征。选择标准包括融合效率、生长和形态特征。对选定的亚克隆作进一步分析,以确保它们能产生稳定的杂交瘤并高效分泌单克隆抗体。经过多轮筛选后,终于获得了一种融合效率和稳定性更加出色的新细胞系,名为 240E-W。

Abcam对细胞系 240E-W 作了进一步优化,以解决内源性 IgG 问题。自 2006 年以来,新的融合伴侣(240E-W2,RabMAb 专利技术的核心部分)已在研究和商业应用中被用来产生兔单克隆抗体。

现在

RabMAb 技术能够为研究、诊断和治疗应用开发出高质量的单克隆抗体。过去 16 年的历程已经证明,RabMAb 技术是能够充分满足科学界各种需求的优质技术。

Abcam 除了提供 14,000 多种一流的 RabMAb 产品之外,还基于定制模式,利用强大的 RabMAb 技术为客户制备高灵敏度和高特异性的抗体。

参考文献

       1. Krause RM.Experimental approaches to homogenous antibody populations:factors controlling        the occurrence of antibodies with uniform properties.Fed Proc. 1970;29:59-65. 

    ·        2. Weller A, Meek J, Adamson ED. Preparation and properties of monoclonal and polyclonal antibodies to mouse epidermal growth factor (EGF) receptors:evidence for cryptic EGF receptors in embryonal carcinoma cells. Development. 1987;100:351-363.

    ·        3. Raybould TJ, Takahashi M. Production of stable rabbit-mouse hybridomas that secrete rabbit mAb of defined specificity. Science. 1988;240:1788-1790.

    ·        4. Verbanac KM, Gross UM, Rebellato LM, et al.Production of stable rabbit-mouse heterohybridomas:characterization of a rabbit monoclonal antibody recognizing a 180 kDa human lymphocyte membrane antigen. Hybridoma. 1993;12:285-295.

    ·        5. Spieker-Polet H, Sethupathi P, Yam PC, et al.Rabbit monoclonal antibodies:generating a fusion partner to produce rabbit-rabbit hybridomas.Proc Natl Acad Sci U S A. 1995;92:9348-9352.

    ·        6. Liguori MJ, Hoff-Velk JA, Ostrow DH.Recombinant human interleukin-6 enhances the immunoglobulin secretion of a rabbit-rabbit hybridoma. Hybridoma. 2001 Jun;20(3):189-98.

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