聚乙二醇 (PEG) 常见问题

​​PEG常见问题解决

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一般类

检测 PEG 的不同形式

试验类

PEG ELISA 试剂盒 (ab215546)


PEG 是什么?

PEG 是聚乙二醇的常用缩写,或者更确切地说是由重复的乙二醇单元组成的复合物。由 O-CH2-CH2 聚合而成,可溶于水、无毒、无抗原性且具备生物兼容性。纯化的 PEG 主要通过他们的分子量 ( MW ) 范围来定义。

例如,PEG 600 是 PEG 聚合物,其分子量( MW ) 为 600。

PEG 10K 或 PEG 10,000 代表平均 MW 为 10,000 g/mol 的 PEG 分子(约 195-265 个 PEG 分子)的混合物。

PEG 具有多种化学特性,因此在各种生物、化学和制药环境中发挥着极大的作用:

  • ​无毒且无免疫原性 - 可添加到培养基中,附着于分子表面并与分子结合,且不会干扰细胞功能或靶向免疫原性
  • 亲水性 (水溶性) - 与蛋白质和其他生物分子偶联减少了他们的聚集,增加了溶解度
  • 灵活度高 - 提供表面处理或生物共轭,无空间位阻

由于这些独特的性质,PEG 通常用于聚乙二醇化各种蛋白质和药物分子 (1)。

我为什么要使用抗 PEG 抗体?

抗 PEG 抗体可用于监测药物的药代动力学,包括分布、代谢和排泄。还可以用于聚乙二醇化蛋白质或分子(例如纳米颗粒)的质量控制。我们的抗体适用于 ELISA、WB 和 IHC。

哪些 PEG 可用?它们的结合特异性(例如 PEG 链长)是什么?

我们提供各种 PEG 抗体以及用于 PEG 检测的试剂盒,包括我们的高亲和力兔单克隆 PEG 抗体:

抗-聚乙二醇抗体 [ PEG-B-47 ] (ab51257)

- 识别 PEG 末端甲氧基。

- 识别分子量为 750 - 40,000 Da 的 PEG。

- 由兔 IgG 组成。

-聚乙二醇抗体 [ PEG-B-47b ](生物素)(ab53449)

- 识别 PEG 末端甲氧基。

ab51257 和 ab53449 是相同克隆号 ( PEG-b-47 )。ab53449 是 ab51257 的生物素化抗体。

- ab53449 在生物素化之前纯化。Protein A 用于纯化该抗体。

-聚乙二醇抗体 [ PEG-2-128 ] (ab133471)

- 具有 PEG 骨架特异性。

- 识别分子量为 5000 - 40,000 Da 的 PEG。

- 由兔 IgM 组成。

PEG ELISA 试剂盒 (ab215546)

- 竞争性定量 ELISA 试剂盒。

ab51257 还在 PEG ELISA 试剂盒 (ab215546) 中被用作捕获抗体。

您的抗体可以检测到的最大最小 PEG 分子是什么?

检测到的最小分子 - PEG 750

检测到的最大分子 - PEG 40K

您推荐使用哪种 PEG 产品检测线性 PEG 和支链 PEG ?

ab51257 和 ab53449 基于我们的内部 ELISA 结果检测线性和支链 PEG。

ab51257 还在 PEG ELISA 试剂盒 (ab215546) 中被用作捕获抗体,因此既可以检测线性 PEG,又可以检测支链 PEG。

您建议使用哪些抗体检测 PEG 骨架?

​​ab133471 对 PEG 分子的骨架具有特异性,并由兔单克隆 IgM 组成。相反,ab51257 对 PEG 分子的终端甲氧基组具有特异性,并由兔 IgG 组成。​​

检测 PEG 的游离(非共轭)形式时,您建议使用哪种 PEG 抗体?

由于游离 PEG 和共轭 PEG 的 MW 不同,因此通过蛋白质印迹法使用抗 PEG(骨架特异性)抗体 ab133471 可以区分这两种形式。

由于 ab133471 能够识别 PEG 骨架,因此 PEG 不需要与其他分子结合。我们拥有使用 PEG5K、6K、20K 获得的直接 ELISA 数据,可以证实这一点。

我们的 RabMAb PEG ELISA 试剂盒 (ab215546) 不能用于检测游离 PEG。

您的 PEG 抗体对我的样本有效吗?例如小鼠和大鼠组织

如果存在 PEG 分子,我们的抗 PEG 抗体将检测聚乙二醇化的分子。我们的 PEG 产品与使用的样本或种属无关。

使用 PEG 抗体做 IHC 实验时,推荐方案是什么?

我们建议使用我们的标准 IHC 方案,稀释系数为 1 : 50 - 1 : 100。

每管 PEG 抗体的体积是多少?

我们的 RabMAb PEG 抗体以 100 μg 为单位提供,因此您可以使用以下计算方式来计算体积:​

(0.1 mg) 除以当前抗体浓度 (mg/ml) = 体积 (ml)

如何用 “N” 计算 PEG 大小?

PEG 名称中通常包含的数字表示它们的平均分子量,例如,n = 9 的 PEG 的平均分子量约为 400 道尔顿,标记为 PEG 400。大多数 PEG 聚合物包含具有不同分子量的 PEG 分子;也就是说它们的聚合程度是不同的。

因此,N/道尔顿为 9/400。只要您有 N 或 道尔顿值,您就可以使用此比率计算道尔顿中的 N 或大小。

使用 PEG ELISA 试剂盒(ab215546)时,应使用哪种缓冲液稀释样本?

​​在试剂盒中使用抗原/抗体稀释缓冲液。可以使用任何含 BSA 和/或 Tween 的基于 PBS 的缓冲液。​​

 PEG ELISA 试剂盒(ab215546)使用哪种类型的检测?

PEG ELISA 试剂盒 (ab215546) 采用基于酶 ( HRP ) 标 PEG 和 PEG 标记分子之间的竞争法检测。96孔板板底包被有 PEG 抗体,能够结合 PEG 分子。

HRP 和底物 TMB 之间的相互作用引起的显色的程度与样本中聚乙二醇化分子的量成反比。

PEG ELISA 试剂盒(ab215546)是否会与含有PEG 的碳氟化合物发生反应?

​​我们尚未测试含 PEG 的碳氟化合物,所以不确定。但是,我们使用试剂盒测试了 H2N-PEG6000-OCH3,并且 H2N-PEG6000-OCH3 未与 HRP-PEG 出现竞争。

PEG 骨架特异性抗体(ab133471)可以与 PEG ELISA 试剂盒(ab215546)共用吗?

ab133471 不能与我们的 PEG ELISA 试剂盒共用。

PEG ELISA 试剂盒(ab215546)中提供的 PEG BSA 参比样品是与 BSA 共轭的单个 PEG,还是与BSA 共轭的 PEG 聚合物?

​​该试剂盒中的 PEG BSA 参比样本约有 5 摩尔 PEG5K 与 1 摩尔 BSA 共轭。

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