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药代动力学研究药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程,并运用数学计算阐释药物在机体内的动态规律。下面实验模型,证实 PEG 抗体可以有效追踪检测 PEG 化抗原在动物模型中的代谢。
1.向大鼠腹膜内注射 100 μg 小鼠 IgG-PEG,模拟待测药物。
2.在注射后分别于 0.5、1、2、4、10、24 和 48 小时进行采血。
3.提取血清,进行竞争法ELISA 检测:补获抗体:PEG抗体(ab51257, 克隆号:PEG-B-47)
4.在96孔板上包被补获抗体(5 μg/mL),然后加入 PEG-HRP 和血清,竞争法 ELISA 定量血清中的 IgG 浓度。
5.根据测量的 IgG 浓度与其标准曲线(图 1),可以确定注射小鼠体内 IgG-PEG 在各个时间点的浓度(图 2)。
如下图所示,PEG 抗体可用于精确定量并研究体内 PEG 化药物或抗原的药代动力学(图 2)。
图 1:竞争法 ELISA 标准曲线:标准品 IgG-PEG(梯度浓度),PEG-HRP(1 : 30,000)。