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SimpleStep ELISA® 试剂盒

​​ELISA 采用单次洗涤方案，90 分钟即可获得高灵敏结果，检测性能不受影响。

  • 采用单次洗涤方案，可将检测时间缩短至 90 分钟或更短
  • 选用优质抗体，灵敏度高、特异性强、可重复性好
  • 已在生物样本中进行全面验证
  • 96 孔板可拆分为 12 x 8 连管
  • 现已推出 10 包装和 384 孔形式


目录


什么是 SimpleStep ELISA®？

SimpleStep ELISA® 试剂盒用于夹心法 ELISA，旨在最大程度地简化 ELISA 检测并提高检测效率。与动辄需要三小时以上检测时间的传统夹心法 ELISA 产品不同，SimpleStep ELISA® 试剂盒采用单次洗涤方案和重组抗体，90 分钟内即可获得结果，不仅检测性能不受影响，特异性还有所提升。

浏览 Abcam 的所有 SimpleStep® 产品


SimpleStep ELISA® 的工作原理是什么？

​图 1. 使用 SimpleStep ELISA® 试剂盒时，溶液中形成分析物-捕获抗体和检测抗体夹心复合物，通过捕获抗体上吸附的亲和标签与微孔板结合。观看 SimpleStep ELISA 工作原理介绍视频。

传统夹心法 ELISA 利用的是一对能够与靶蛋白上至少两个不同表位结合的抗体。捕获抗体预包被在微孔板的微孔表面，并选择性地与靶蛋白结合。洗涤后，加入检测抗体，与靶蛋白的第二位点结合，形成夹心复合物。

SimpleStep ELISA 试剂盒使用 CaptSure™ 半均相系统，仅需一步即可在溶液中形成抗体-分析物夹心复合物。此外，仅需一次孵育和一次洗涤，即可在孔内形成完整的夹心复合物，并通过免疫亲和标签将其固定至微孔板上（图 1）。

ELISA 升级

SimpleStep ELISA® 特性​对于用户的价值
使用重组抗体，灵敏度高、特异性强、可重复性好首次尝试即可获得一致、可靠的结果
经过生物样本验证与内源性蛋白之间的反应有保障
单次洗涤标准实验方案，快速（90 分钟）获得结果所有 SimpleStep ELISA® 试剂盒均使用同一实验方案，简单快速，实验误差更小
96 孔板，可拆分为 12 x 8 连管不浪费，同一试剂盒可用于若干小量实验
现已推出 10 包装保证同一批次


竞争法 SimpleStep ELISA®

abcam 的竞争法 SimpleStep ELISA® 试剂盒与夹心法 SimpleStep 试剂盒一样具有过程快速和操作简单的优势，两者的实验方案和操作时间（90 分钟）也相同。

使用 abcam 的竞争法 SimpleStep ELISA® 试剂盒，可以检测夹心法 ELISA 无法测定的小分子和激素，因为这些小分子和激素只有一个表位或抗体结合位点。

abcam 的竞争法 SimpleStep ELISA® 试剂盒使用了这样一种亲和标签，它能够被包被在 SimpleStep ELISA® 微孔板上的单克隆抗体所识别。竞争法 ELISA® 仅需一步即可形成抗体-分析物复合物，大大节省了操作时间。

在 antigen-down 形式中，CaptSure™ 亲和标签标记的抗原和样本中未标记的抗原与 HRP 标记的捕获抗体竞争结合。在 antibody-down 形式中，样本中的 HRP 标记抗原和未标记抗原与 CaptSure™ 亲和标签标记的捕获抗体竞争结合。CaptSure™ 标记的抗原或抗体与 SimpleStep ELISA® 微孔板结合。与仅含标记抗原的检测孔相比，如果信号减少，则表明样本中存在抗原。

​

​为什么在 SimpleStep ELISA® 试剂盒中使用重组抗体？

ELISA 需要借助抗体来检测靶抗原，所以选用的抗体必须具有高度特异性。

重组单克隆抗体是使用高产率表达载体在体外培养形成，具备多项优势，包括：

  • 一致性高、可重复性领先。
  • 灵敏度提高、特异性得到确认。
  • 易于量产、可持续供应。

尽可能在 SimpleStep ELISA® 中使用重组单克隆抗体，这样有望第一次即获得可靠的可重复性结果。

这些抗体对经过优化，可用于生理学相关样本，例如血浆和血清。我们还提供无载体蛋白的抗体对、可随时偶联的抗体对以及单独的捕获抗体和检测抗体，保障您的整个工作流程具有灵活性和一致性。


灵敏度不受影响

SimpleStep ELISA® 试剂盒在不影响检测性能的前提下大幅缩短了检测时间。我们比较了 SimpleStep ELISA® 试剂盒与其竞品测定 75 种常见人类和小鼠蛋白的灵敏度。在这 75 例测定中，有 56 例显示 SimpleStep ELISA® 的灵敏度显著高于竞品（图 2）。

​图 2. SimpleStep ELISA® 试剂盒与其竞品对 75 种常见靶蛋白的检测灵敏度的比较及其比值。SimpleStep ELISA® 的平均灵敏度优于竞品。


根据国际标准品进行校准

我们对所有的分泌血清或血浆靶点进行了检测，结果均在世界卫生组织的血液参考范围之内。SimpleStep ELISA® 试剂盒已根据常用的 NIBSC 国际标准品进行了校准，并附有换算系数，用于数据对比。

对于由不同试剂盒生成的数据集，根据相同的国际标准品进行校准后便能进行比较。此外，每个 SimpleStep ELISA® 试剂盒均使用多个生物样本进行了特异性验证。

SimpleStep ELISA® 试剂盒 NIBSC 换算系数示例

产品

AbID

标准 ID

NIBSC 换算系数

人促红细胞生成素 (EPO)

ab274397

11/170

0.001

人 α1 抗胰蛋白酶 (SERPINA1)

ab189579

05/162

0.3649

人 BMP2

ab277085

93/574

0.00024

人 C 肽

ab260064

13/146

1.077

人 Flt-3 配体

ab254507

96/532

0.0014

查看完整表格


高通量筛选 (HTS) 和 SimpleStep ELISA®

我们专门开发了 HTS 工具和试剂，保障您每次筛选时都能快速获得可靠的可重复性结果。我们所有的 SimpleStep ELISA® 试剂盒均可使用 384 孔 SimpleStep ELISA® 微孔板，适用于 384 孔板检测。这些预先包被的微孔板兼容自动液体处理系统，通过适用于多种标准酶标仪的灵活解决方案，帮助您扩大研究规模。

免疫检测 4 倍提速

同样在 90 分钟内，我们的 384 孔 SimpleStep ELISA® 试剂盒可以处理的样本比传统 ELISA 多 4 倍。

我们推出了 90 分钟即得结果的 384 孔 SimpleStep ELISA® 试剂盒。384 孔 SimpleStep ELISA® 微孔板与 384 孔 SimpleStep ELISA® 试剂盒采用和标准试剂盒一样的快速、简便的单次洗涤方案，但是需要的样本更少，仅为 96 孔 SimpleStep ELISA 试剂盒所需样本量的四分之一。

点击查看有关 abcam 384 孔 SimpleStep ELISA 微孔板的更多技术信息

点击查看有关 abcam 基于 ELISA 的高通量筛选解决方案的更多信息


SimpleStep ELISA® 试剂盒和 SPECTROstar®Nano

为使 SimpleStep ELISA® 试剂盒实现最佳效果，建议您在做检测时使用  SPECTROstar®Nano。使用 SPECTROstar®Nano  读取微孔板结果可以得到优质的数据，便于将数据分析与 MARS 数据分析模板关联起来，最终获得即时准确的结果。

请查看以下三份应用指南，了解如何搭配使用 SPECTROstar®Nano 和 SimpleStep ELISA® 试剂盒。

点击下载


应用指南 1：90 分钟即得结果的高灵敏 ELISA：SimpleStep ELISA® 试剂盒和 SPECTROstar® Nano。

查看操作方法：

  • SimpleStep ELISA® 单次洗涤方案可以在缩短检测时间的同时保持高灵敏度、高特异性和高可重复性
  • 使用 SPECTROstar®Nano 和 MARS 数据简化软件可以简化检测和分析


应用指南 2：使用 SimpleStep ELISA® 试剂盒和 SPECTROstar®Nano，高度灵敏、快速地测定肿瘤免疫生物标志物。

了解原因：

  • 确定生物标志物的表达对于优化肿瘤免疫治疗至关重要
  • abcam 的 SimpleStep ELISA® 试剂盒可以检测数百种肿瘤相关标志物
  • SPECTROstar®Nano 简化了数据收集工作，利用 MARS 数据分析可以快速获得结果


应用指南 3：使用 SimpleStep ELISA® 试剂盒和 SPECTROstar®Nano，快速准确地检测阿兹海默症靶点

了解详情：

  • 为何评估神经元靶点的表达是阿兹海默症研究的重要内容
  • SimpleStep ELISA® 试剂盒如何通过单次洗涤方案在 90 分钟内定量测定 BDNF、Tau 和 TREM2
  • SPECTROstar®Nano 如何进行检测，如何通过 MARS 分析软件自动分析结果


SimpleStep ELISA 试剂盒与 PHERAstar FSX

详细了解如何使用 384 孔 SimpleStep ELISA® 和 PHERAstar FSX 来定量测定人 IgG 和人 IFN γ 这两个重要的药代动力学研究和免疫治疗药物安全性测试靶点：

高通量 90 分钟 ELISA 应用指南：384 孔 SimpleStep ELISA® 兼容 PHERAstar FSX

了解如何在 384 孔时间分辨荧光 (TRF) 免疫检测中使用我们的 MAP 试剂盒检测免疫应答细胞信号传导相关的蛋白激酶 IRAK4，并在 PHERAstar FSX 上读数。

使用抗体对试剂盒和 PHERAstar FSX 进行 384 孔板时间分辨荧光 (TRF) 免疫检测的应用指南


分析物范围

目前，SimpleStep ELISA® 试剂盒可检测包括 PD-L1、GFP 和纤维蛋白等常见靶点在内的近 700 种靶点，这个数字还在不断上升。

面向十种最常见 ELISA 靶点的 SimpleStep ELISA® 试剂盒：

靶点

人

小鼠

大鼠

IgG*

ab195215


ab189578

Albumin

ab179887**

ab227933

ab207620

ab235642

TNF α

ab181421

ab208348


IL-6

ab178013

ab222503

ab234570

IFN Gamma

ab174443



IL-1 beta

ab214025

ab197742


GFPab171581***

Alpha 1 antitrypsin

ab189579



Pro collagen I alpha

ab210966

ab210579


Fibrinogen

ab241383

ab213478


* 另可用于兔、仓鼠、狗和豚鼠样本

** 另可与恒河猴样本发生反应

*** 多种属


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ELISA 指南

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