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细胞毒性通常通过评估细胞膜损伤进行检测。
浏览下文,了解有关这些检测方法的更多信息,或者查看我们最受欢迎的细胞毒性检测试剂盒,包括 LDH 检测试剂盒、DRAQ7® 以及我们的活细胞:死细胞多染检测试剂盒。
除直接进行细胞毒性检测外,还可以通过检测细胞活性,例如细胞群中的健康细胞数,来间接检测细胞毒性。了解如何进行细胞活性检测,例如使用 MTT、MTS、刃天青、线粒体膜电位依赖性染料、细胞酯酶裂解染料,或通过测定 ATP、ADP、糖酵解量或耗氧量进行检测。
您还可以了解细胞凋亡检测,例如膜联蛋白 V、TUNEL 和 Caspase 检测;以及细胞增殖/细胞周期检测,例如使用染料稀释、BrdU/EdU 和 DNA 染色染料进行的此类检测。
其他细胞毒性检测法还有 SRB 检测,它将磺酰罗丹明 B 染料的结合水平作为活细胞数的衡量指标。结晶紫检测的工作原理与此相似。
这些检测都能测定细胞膜出现损伤时,漏出到细胞外基质中的酶活性。乳酸脱氢酶(LDH)检测最为普遍。
LDH 检测/乳酸脱氢酶检测试剂盒 ab65393 和 ab197004:LDH 氧化乳酸盐,生成一种有色产物或荧光(Ex/Em 535/587 nm)产物。酶标仪。
AK 检测试剂盒/腺苷酸激酶检测试剂盒 ab228557:检测时,AK 通过荧光素酶发光将 ADP 转换为 ATP。AK 的活性没有 LDH 持久。酶标仪。
细胞活性检测通常使用不可穿透膜的荧光染料(最常见的是 DNA 染料),通过受损细胞膜对细胞进行染色。由于碘化丙啶发射光谱宽且倾向于与活细胞结合,因此在细胞活性检测中,大部分碘化丙啶被 DRAQ7™ 和 7-AAD 取代。
DRAQ7™ ab109202:Ex/Em 633 & 647/665–800 nmDNA 染色。流式细胞仪、显微镜。
7-AAD ab228563:Ex/Em 488/647 nm。DNA 染色。流式细胞仪、显微镜。
碘化丙啶 ab14083:Ex/Em 536/617 nm。DNA 染色。随时间推移从细胞中滤出。流式细胞仪、显微镜。
溴乙啡啶二聚体-1:Ex/Em 528/617 nm。DNA 染色。流式细胞仪、显微镜。
台盼蓝:非荧光细胞染色。典型的细胞活性检测,需要对细胞进行计数。非常适合少量样本。显微镜。
胺反应性染料可以与细胞表面的胺类结合,对活细胞进行弱染色;但可以与细胞内的胺类反应,对缺乏抵抗的细胞膜进行强染色。通过荧光水平区分死细胞和活细胞。
在流式细胞仪上使用。可进行固定。
ab176738:Ex/Em 410/450 nm。
ab176739:Ex/Em 408/512 nm
ab176740:Ex/Em 398/550 nm
ab176741:Ex/Em 353/442 nm
ab176742:Ex/Em 498/521 nm
ab176743:Ex/Em 547/573 nm
ab176744:Ex/Em 583/603 nm
ab176745:Ex/Em 649/660 nm
活细胞:死细胞检测可搭配使用多种染料。例如广受欢迎的活细胞和死细胞检测试剂盒 ab115347 使用溴乙啡啶二聚体标记死细胞,使用酯酶裂解染料标记活细胞。或者,细胞活性检测试剂盒(荧光检测法 — 绿/红双色) ab112121,使用红色 DNA 染色染料对死细胞染色,使用绿色酯酶裂解染料对活细胞染色。
查看以下指南,了解更多内容:
测定持续细胞活动的速率,如新陈代谢。
使用细胞染色染料监测细胞群的生长,监测子代细胞的代数或分析细胞群的细胞周期状态。
测定不同类型细胞死亡中出现的标志物。