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CD9是跨膜四超家族成员,它还是与整合素相关的整合膜蛋白,可调节不同的过程,如精卵融合,血小板活化和聚集,以及细胞粘附等。
在巨噬细胞中,CD9功能与CD81以及β-1和β-2整合素相关,并阻止巨噬细胞融合成多核巨细胞,多核巨细胞专门吞噬补体调理大颗粒。
CD9参与血小板活化和聚集,它还参与细胞粘附、细胞运动和肿瘤转移。
CD9最初被认为是一种特殊的外泌体标记物,然而,它现在被认为是单核细胞和巨噬细胞的抗炎标记物。
CD9在多种造血细胞和非造血细胞中表达,如基质细胞、巨核细胞、血小板、B和T淋巴细胞、树突状细胞、内皮细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱粒细胞等。
胞外或胞外体、细胞膜
图二:CD9靶点ICC实验结果图,Anti-CD9 antibody [EPR23105-121]产品(ab236630)。绿色:CD9,红色:alpha Tubulin,蓝色:DAPI。 |
人(P21926):25.4 kDa(预测)
小鼠(P40240):25.2 kDa(预测)
大鼠(P40241):25.2 kDa(预测)
棕榈酰化
CD9蛋白以三种形式存在,分子质量介于22到27 kDa之间,能与脂肪酸共价连接。
二硫键,糖蛋白,脂蛋白,棕榈酸酯
CD9在部分组织和细胞株系表达,并且其表达量在不同组织和细胞株系也有差别,建议设置阳性对照。
CD9是一个多次跨膜蛋白,强烈建议提取蛋白时不煮样,防止蛋白聚集;表达量较低的细胞可通过提取膜蛋白富集靶标蛋白。
在对外泌体进行CD9检测时,CD9的蛋白丰度十分重要,若提取的外泌体中CD9含量较低,易出现无信号现象。更多外泌体提取方案和研究指南见参考文献[1,2]。
CD9是一个蛋白分子量比较小的蛋白,建议在电泳和转膜时根据小分子蛋白操作流程进行实验。
实际检测到的分子大小可能与预测不符。预测条带大小约25 kDa,检测条带大小约22 kDa。
HeLa和HCT116全细胞裂解液
小鼠心脏和肾脏组织裂解液
Raji全细胞裂解液
人CD9敲除HeLa 细胞系(ab255375)
图三:WB-Anti-CD9 antibody [EPR23105-121]产品(ab236630)。一抗:使用Anti-CD9 antibody [EPR23105-121]一抗,浓度1/1000稀释。泳道1:人扁桃体裂解液;泳道2:人结肠裂解液;二抗:使用Goat Anti-Rabbit IgG H&L (HRP) (ab97051)二抗,浓度1/100000稀释。预测条带大小:25 kDa检测条带大小:22 kDa | |
图四:WB-Anti-CD9 antibody [EPR23105-121]产品(ab236630)。一抗:使用Anti-CD9 antibody [EPR23105-121]一抗,浓度1/1000稀释。泳道1:HCT116全细胞裂解液;泳道2:Raji全细胞裂解液;二抗:使用Goat Anti-Rabbit IgG H&L (HRP) (ab97051)二抗,浓度1/100000稀释。预测条带大小:25 kDa检测条带大小:22kDa |