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图一:Estrogen Receptor beta靶点蛋白结构。图片来源:SWISS-MODEL。 |
Estrogen Receptor beta(ERβ) 是核激素受体家族NR3亚家族成员,其结合雌激素的亲和力与ERα类似,以雌激素依赖的方式激活含有雌激素应答元件(Estrogen Response Elements, ERE)的报告基因的表达。
人源ERβ拥有多个异构体,其中ERβ异构体1(ERβ1)会形成功能性的同源二聚体,再与其他异构体形成异源二聚体。ERβ1与ERα形成异源二聚体后会抑制ERα的信号通路。
ERβ会受到表观遗传多方面的调控,包括CpG岛的高度甲基化、组蛋白翻译后修饰、小非编码RNA或miRNA的影响。
ERβ在肿瘤细胞代谢中发挥重要作用,涉及的通路包括脂类代谢、氧化磷酸化和糖酵解等。
针对前列腺癌、乳腺癌和甲状腺癌等临床研究表明,肿瘤发生发展过程中, ERα/ERβ的比例会变化,前者表达会上调而后者表达会下调。由于ERβ抗增殖活性愈发明显,该受体有望成为相关癌症治疗的重要靶标。
人源异构体1:在睾丸和卵巢中表达,在心脏、大脑、胎盘、肝脏、骨骼肌、脾脏、胸腺、前列腺、结肠、骨髓、乳腺和子宫中表达水平较低。在乳腺癌和卵巢癌细胞系中发现,但在结肠癌和肝癌中不存在。
人源异构体2:在脾脏、胸腺、睾丸和卵巢中表达,在骨骼肌、前列腺、结肠、小肠、白细胞、骨髓、乳腺和子宫中表达水平较低。
人源异构体4:在睾丸中表达。
人源异构体5:在睾丸中表达,脾脏、胸腺、卵巢、乳腺和子宫中表达水平较低。
人源异构体6: 在睾丸、胎盘、骨骼肌、脾脏和白细胞中表达,在心脏、肺、肝、肾、胰腺、胸腺、前列腺、结肠、小肠、骨髓、乳腺和子宫中表达水平较低。在大脑中不表达。
细胞核
图二:Estrogen Receptor beta 蛋白的ICC实验结果图,Anti- Estrogen Receptor beta (phospho S105)抗体(ab62257)。绿色:Estrogen Receptor beta。 |
人(Q92731):
异构体1~2,4~6,9(Q92731-1~2, Q92731-4~6, Q92731-9)52.9-59.2 kDa(预测)
异构体7(Q92731-7)48.9 kDa(预测)
异构体8(Q92731-8)41.9 kDa(预测)
异构体3(Q92731-3)35.9 kDa(预测)
小鼠(O08537):
异构体1~2(O08537-1~2)59.0-61.0 kDa(预测)
异构体3(O08537-4)48.5 kDa(预测)
异构体5(O08537-7)42.1 kDa(预测)
异构体4(O08537-6)38.1 kDa(预测)
大鼠(Q62986):
异构体1~2(Q62986-1~2)59.1-61.1 kDa(预测)
异构体3~4(Q62986-3~4)54.6-56.6 kDa(预测)
异构体5(Q62986-5)47.9 kDa(预测)
磷酸化
请注意不同样本中ERβ的表达量存在差异,例如乳腺癌细胞中可能检测检测不到该蛋白的表达。因此实验前需要确认靶标蛋白表达量。 推荐抗体产品说明书中使用的样本作为阳性对照。
ERβ定位于细胞核,超声破碎样品有助于富集更多靶标蛋白。为进一步保证充足的上样量,可以尝试提取细胞核组分进行WB实验。
ERβ在人、大鼠和小鼠中都含有多个异构体,因此WB实验中可能会检测到多条条带。
人MCF7细胞核裂解液
人Hs 578T全细胞裂解液
图三:Estrogen Receptor beta 蛋白的WB实验结果图,Anti- Estrogen Receptor beta抗体(ab3576)。泳道1:人MCF7全细胞裂解液(20ug)。泳道2:人MCF7细胞核裂解液(20ug)。泳道3:人T47D全细胞裂解液(20ug)。泳道4:人T47D细胞核裂解液(20ug)。泳道5:人SK-BR-3全细胞裂解液(20ug)。泳道6:人SK-BR-3细胞核裂解液(20ug)。泳道7:人Hs 578T全细胞裂解液(20ug)。泳道8:人Hs 578T细胞核裂解液(20ug)。预测条带大小:59 kDa |