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Alejandra Solache 博士于 21:03 在本次网络研讨会中介绍了有关抗体 KO 验证的更多信息,本次网络研讨会是抗体协会主办的“抗体验证网络研讨会系列”的一部分。
多项研究已经证实,生命科学试剂具有不可重复性,就抗体而言,这通常是由于抗体对其目标靶点缺乏特异性所致。这种与交叉反应性和脱靶蛋白结合等问题相关的特异性缺乏,导致了所谓的“可重复性危机”1,2。
KO 验证是接受度最广且最受信任的抗体特异性验证过程之一3,4。这种技术十分可靠,可以通过在不表达靶蛋白的 KO 细胞系、细胞裂解液或组织中检测抗体来确认抗体的特异性。因此,特异性抗体在 KO 细胞系中应不产生信号,但在野生型细胞系中应产生特异性信号。因此,KO 验证可作为真正的阴性对照5。
为了确保我们的抗体具有特异性并且可以提供可重复性结果,我们在大规模应用进行 KO 验证。我们在多种应用(包括流式细胞术、western blot 和免疫细胞化学)中针对每个靶标使用多种抗体验证了我们的抗体,并将表现出特异性的抗体标记为特殊“KO 验证”抗体,同时将出现脱靶结合的抗体从我们的目录中删除。我们现在已通过 KO 验证证实了超过 2500 种抗体对 2000 多种蛋白靶标的特异性。
Abcam KO 验证计划的主要感受:
Alejandra Solache 博士于 2013 年 12 月加入 Abcam,负责管理 Abcam 在英国剑桥、中国杭州以及美国康涅迭戈州尤金和布兰德福的全球新品开发和验证团队。Alejandra 在制定 Abcam 的创新策略和产品线方面也发挥着重要作用。
加入 Abcam 前,Alejandra 曾担任 EMD-Millipore 的研发总监,领导抗体和检测开发团队,她在 EMD-Millipore 履职 8 年,担任过不同职位。她在加州大学旧金山分校和 Trudeau 研究所(纽约萨拉纳克湖)进行博士后研究期间,接受了生命科学研究人员方面的培训,并积累了免疫学、细胞信号转导和表观遗传学方面的专业知识。