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α-突触核蛋白检测方案

检测 α-突触核蛋白(alpha synuclein protein)单体和聚合物与硫代黄素 T( Thioflavin T) 的结合​

1.使用 dH2O 制备 1 mM 的硫代磺素 T (ThT) 储液(新鲜制备且使用0.2 μm 过滤器过滤)。

2.使用 PBS (pH 7.4) 稀释 ThT,使每个孔的ThT终浓度为 25 μM。

3.使用前在冰上解冻 α-突触核蛋白(单体和聚合物)。

4.向相应的孔中加入 10 nM 聚合物或 100 μM 单体(或两者均加)。

5.使用膜封板并放置在 37℃ 的振荡孵育器 (600 rpm) 中。

6.使用荧光酶标仪(ex 450 nm,em 485 nm)检测ThT 荧光信号,在 37℃ 下读取1 到72 小时的值。

当10 nM α-突触核蛋白聚合物 (ab218819) 与 100 μM 活性 α-突触核蛋白单体 (ab218818)结合时 (浅蓝色图示),ThT荧光值随着时间的增加而增加(与 α-突触核蛋白聚集相关),较之其它实验组更高。包括100 μM 活性 α-突触核蛋白单体与 10 nM 对照 α-突触核蛋白聚合物结合(紫线图示),或100 μM 对照 α-突触核蛋白单体 (ab218816) 与 10 nM 对照 α-突触核蛋白聚合物 (ab218817)结合(深蓝色图示)。ThT ex = 450 nm,em = 485 nm。​

1.图表显示与 α-突触核蛋白单体、聚合物和对照品相互作用后的 ThT 荧光。

​​产品

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产品名称

Ab 编号

重组人 α-突触核蛋白单体(活性)

ab218818

重组人 α-突触核蛋白聚合物(活性)

ab218819

重组人 α-突触核蛋白单体(对照)

ab218816

重组人 α-突触核蛋白聚合物(对照)

ab218817

硫代黄素 T (ThT)

ab120751

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