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研究转录因子激活最常用的检测方法的优缺点。
电泳迁移率变动检测 (EMSA)/凝胶迁移率检测
EMSA 技术是最流行的蛋白-DNA 相互作用检测技术,它的原理是,在非变性凝胶电泳中,蛋白-DNA 复合物的迁移速度比游离的线性 DNA 片段慢。
ChIP 用于鉴定天然细胞内环境中的蛋白-DNA 结合事件。其原理是,对已选择性富集的染色质片段中的特异性蛋白进行检测。蛋白在基因组中一个或多个位置的相对丰度可以通过 qPCR 确定。ChIP 还可以进一步用于鉴定基因组中的特异性结合序列 (ChIP-seq)。
此类检测可检测转录因子与结合到微孔板上的 DNA 反应元件的结合情况,用于确定突变或药物化合物在信号激活中的作用。
如果您需要一种快速简单的方法来研究 NFkB、FOXO1 或 c-myc 等因子的激活,我们的检测试剂盒在 4 小时内即可给出结果。
使用 AP1 (c-Fos/FosB/Fra1/c-Jun/JunD) 转录因子检测试剂盒(比色法)(ab207196),检测用 5 µg TPA 刺激的 K-562 细胞核提取物中的 AP1 家族成员 c-Jun、c-Fos、FosB、JunB、JunD 和 Fra-1 的活性。在不存在(灰色)或存在野生型(黑色)或突变型(白色)共有结合序列寡核苷酸的情况下孵育提取物。