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SimpleStep ELISA® 试剂盒用于夹心法 ELISA,旨在最大程度地简化 ELISA 检测并提高检测效率。与动辄需要三小时以上检测时间的传统夹心法 ELISA 产品不同,SimpleStep ELISA® 试剂盒采用单次洗涤方案和重组抗体,90 分钟内即可获得结果,不仅检测性能不受影响,特异性还有所提升。
图 1. 使用 SimpleStep ELISA® 试剂盒时,溶液中形成分析物-捕获抗体和检测抗体夹心复合物,通过捕获抗体上吸附的亲和标签与微孔板结合。观看 SimpleStep ELISA 工作原理介绍视频。
传统夹心法 ELISA 利用的是一对能够与靶蛋白上至少两个不同表位结合的抗体。捕获抗体预包被在微孔板的微孔表面,并选择性地与靶蛋白结合。洗涤后,加入检测抗体,与靶蛋白的第二位点结合,形成夹心复合物。
SimpleStep ELISA 试剂盒使用 CaptSure™ 半均相系统,仅需一步即可在溶液中形成抗体-分析物夹心复合物。此外,仅需一次孵育和一次洗涤,即可在孔内形成完整的夹心复合物,并通过免疫亲和标签将其固定至微孔板上(图 1)。
ELISA 升级
SimpleStep ELISA® 特性 | 对于用户的价值 |
使用重组抗体,灵敏度高、特异性强、可重复性好 | 首次尝试即可获得一致、可靠的结果 |
经过生物样本验证 | 与内源性蛋白之间的反应有保障 |
单次洗涤标准实验方案,快速(90 分钟)获得结果 | 所有 SimpleStep ELISA® 试剂盒均使用同一实验方案,简单快速,实验误差更小 |
96 孔板,可拆分为 12 x 8 连管 | 不浪费,同一试剂盒可用于若干小量实验 |
现已推出 10 包装 | 保证同一批次 |
abcam 的竞争法 SimpleStep ELISA® 试剂盒与夹心法 SimpleStep 试剂盒一样具有过程快速和操作简单的优势,两者的实验方案和操作时间(90 分钟)也相同。
使用 abcam 的竞争法 SimpleStep ELISA® 试剂盒,可以检测夹心法 ELISA 无法测定的小分子和激素,因为这些小分子和激素只有一个表位或抗体结合位点。
abcam 的竞争法 SimpleStep ELISA® 试剂盒使用了这样一种亲和标签,它能够被包被在 SimpleStep ELISA® 微孔板上的单克隆抗体所识别。竞争法 ELISA® 仅需一步即可形成抗体-分析物复合物,大大节省了操作时间。
在 antigen-down 形式中,CaptSure™ 亲和标签标记的抗原和样本中未标记的抗原与 HRP 标记的捕获抗体竞争结合。在 antibody-down 形式中,样本中的 HRP 标记抗原和未标记抗原与 CaptSure™ 亲和标签标记的捕获抗体竞争结合。CaptSure™ 标记的抗原或抗体与 SimpleStep ELISA® 微孔板结合。与仅含标记抗原的检测孔相比,如果信号减少,则表明样本中存在抗原。
ELISA 需要借助抗体来检测靶抗原,所以选用的抗体必须具有高度特异性。
重组单克隆抗体是使用高产率表达载体在体外培养形成,具备多项优势,包括:
尽可能在 SimpleStep ELISA® 中使用重组单克隆抗体,这样有望第一次即获得可靠的可重复性结果。
这些抗体对经过优化,可用于生理学相关样本,例如血浆和血清。我们还提供无载体蛋白的抗体对、可随时偶联的抗体对以及单独的捕获抗体和检测抗体,保障您的整个工作流程具有灵活性和一致性。
SimpleStep ELISA® 试剂盒在不影响检测性能的前提下大幅缩短了检测时间。我们比较了 SimpleStep ELISA® 试剂盒与其竞品测定 75 种常见人类和小鼠蛋白的灵敏度。在这 75 例测定中,有 56 例显示 SimpleStep ELISA® 的灵敏度显著高于竞品(图 2)。
图 2. SimpleStep ELISA® 试剂盒与其竞品对 75 种常见靶蛋白的检测灵敏度的比较及其比值。SimpleStep ELISA® 的平均灵敏度优于竞品。
我们对所有的分泌血清或血浆靶点进行了检测,结果均在世界卫生组织的血液参考范围之内。SimpleStep ELISA® 试剂盒已根据常用的 NIBSC 国际标准品进行了校准,并附有换算系数,用于数据对比。
对于由不同试剂盒生成的数据集,根据相同的国际标准品进行校准后便能进行比较。此外,每个 SimpleStep ELISA® 试剂盒均使用多个生物样本进行了特异性验证。
SimpleStep ELISA® 试剂盒 NIBSC 换算系数示例
产品 | AbID | 标准 ID | NIBSC 换算系数 |
人促红细胞生成素 (EPO) | ab274397 | 11/170 | 0.001 |
人 α1 抗胰蛋白酶 (SERPINA1) | ab189579 | 05/162 | 0.3649 |
人 BMP2 | ab277085 | 93/574 | 0.00024 |
人 C 肽 | ab260064 | 13/146 | 1.077 |
人 Flt-3 配体 | ab254507 | 96/532 | 0.0014 |
我们专门开发了 HTS 工具和试剂,保障您每次筛选时都能快速获得可靠的可重复性结果。我们所有的 SimpleStep ELISA® 试剂盒均可使用 384 孔 SimpleStep ELISA® 微孔板,适用于 384 孔板检测。这些预先包被的微孔板兼容自动液体处理系统,通过适用于多种标准酶标仪的灵活解决方案,帮助您扩大研究规模。
我们还在不断推出 90 分钟即得结果的 384 孔 SimpleStep ELISA® 试剂盒。384 孔 SimpleStep ELISA® 微孔板与 384 孔 SimpleStep ELISA® 试剂盒采用和标准试剂盒一样的快速、简便的单次洗涤方案,但是需要的样本更少,仅为 96 孔 SimpleStep ELISA 试剂盒所需样本量的四分之一。
点击查看有关 abcam 384 孔 SimpleStep ELISA 微孔板的更多技术信息
点击查看有关 abcam 基于 ELISA 的高通量筛选解决方案的更多信息
为使 SimpleStep ELISA® 试剂盒实现最佳效果,建议您在做检测时使用 SPECTROstar®Nano。使用 SPECTROstar®Nano 读取微孔板结果可以得到优质的数据,便于将数据分析与 MARS 数据分析模板关联起来,最终获得即时准确的结果。
请查看以下三份应用指南,了解如何搭配使用 SPECTROstar®Nano 和 SimpleStep ELISA® 试剂盒。
应用指南 1:90 分钟即得结果的高灵敏 ELISA:SimpleStep ELISA® 试剂盒和 SPECTROstar® Nano。
查看操作方法:
应用指南 2:使用 SimpleStep ELISA® 试剂盒和 SPECTROstar®Nano,高度灵敏、快速地测定肿瘤免疫生物标志物。
了解原因:
应用指南 3:使用 SimpleStep ELISA® 试剂盒和 SPECTROstar®Nano,快速准确地检测阿兹海默症靶点
了解详情:
目前,SimpleStep ELISA® 试剂盒可检测包括 PD-L1、GFP 和纤维蛋白等常见靶点在内的近 700 种靶点,这个数字还在不断上升。
面向十种最常见 ELISA 靶点的 SimpleStep ELISA® 试剂盒:
靶点 | 人 | 小鼠 | 大鼠 | |
IgG* | ||||
Albumin | ||||
TNF α | ||||
IL-6 | ||||
IFN Gamma | ||||
IL-1 beta | ||||
GFP | ab171581*** | |||
Alpha 1 antitrypsin | ||||
Pro collagen I alpha | ||||
Fibrinogen |
* 另可用于兔、仓鼠、狗和豚鼠样本
** 另可与恒河猴样本发生反应
*** 多种属
ELISA 指南