常见技术问题 (FAQs)

常见技术问题由我们技术支持团队的专家回答

我能得到产品的免费样品吗?

我们不提供用作测试目的的免费样品或试用装样品。我们的政策是如果某种抗体的性能与数据表上的说明不同,我们将提供换货或退款服务。如果抗体用于未测试的物种或应用,我们不提供换货或退款服务;但是,我们邀请您采用 Abreviews 系统 让我们和其他科学家知道这种抗体的性能。我们会在每种产品的在线数据表上公布包括正面和负面在内的所有 Abreviews。

通过 Abreviews 系统,研究人员可以提交对我们产品的评论并换取 Abpoints。Abpoints 可兑换成将来购买抗体的折扣券,或者兑换成诸如亚马逊礼品卡之类的奖品。您可以在产品数据表上提交 Abreviews。

查看更多关于 Abreviews 的信息

 

我能享受到折扣吗?

关於折扣或购买任何产品,请联系 我们的授权代理分销商。

 

数据表上的信息是最新且正确的吗?

数据表包含了我们能获得的关于该产品的最新信息。当我们获得另外的信息时,网站上的数据表会实时更新,因此数据表绝不会过时。

 

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我应如何选择适当的二抗?

二抗应抗所用一抗的宿主物种。例如,如果一抗是小鼠单克隆抗体,则需要抗小鼠的二抗。我们建议您核查二抗的数据表,确保该二抗在您即将采用的应用中是测试过的。我们提供与一系列荧光染料和发色团偶联的各种不同二抗。

以下几点建议:

  • 点击一抗数据表左侧的 "相关产品" 框,此时会弹出合适的二抗列表。
  • 要找到您自己的二抗,请从所有页面顶端的导航菜单“产品”栏中选择二抗。选择所用一抗的宿主物种。然后您会得到一个不同偶联物的供选列表。选择合适的偶联物,然后在提供合适抗体的列表上查看数据表。
  • 同时也可以查看我们有关 如何选择二抗的更详尽页面。

 

我应如何选择同型对照?

同型对照用来确认一抗结合是特异性的,而不是非特异性 Fc 受体结合或者其他蛋白质相互作用的结果。同型对照抗体应当同一抗的宿主物种、同型和偶联物相匹配。例如,如果一抗为 FITC 偶联的小鼠 IgG1,则需要选择 FITC 偶联的小鼠 IgG1 同型对照。

要在我们网站上查找合适的同型对照,请转到顶端导航菜单的“产品”栏。选择“同型对照”,然后选择一抗的物种和亚类。此时会提供可用于此一抗物种和同型的一系列同型对照。

多克隆同型对照
大多数同型对照是单克隆的。它们不适用于多克隆抗体,因为多克隆抗体包含不止一个 IgG 亚类。但是,我们能提供在这些情况下使用的数种多克隆同型对照。

 

我应如何选择阳性对照?

如果您需要合适的阳性对照,请核查数据表,上面通常会有建议的阳性对照。应始终确保所用组织或细胞系来自于测试过的物种。不是所有的数据表都有建议的合适对照,在这些情况下我们推荐以下步骤:

  • 检查是否有关于这种抗体的任何 Abreviews。已由这些客户顺利采用的任何组织、细胞或溶菌产物都可以考虑用作合适的阳性对照。
  • 尝试查看数据表上的 Swiss-ProtOmnigene 数据库链接。这些数据库通常提供存在此种蛋白质表达的组织列表。这些组织也可考虑用作合适的阳性对照。
  • GeneCards 条目里查找这种蛋白质。通常您可在此处获得蛋白质在不同组织中的相对表达水平。
  • 如果您仍然很难找到合适的对照,我们建议在 PubMed 中对相关文献进行快速搜索,查看哪些组织或者细胞表达目标蛋白质。

 

对这种抗体我应采用什么抗原修复法?

我们并不总是具有关于免疫组化中最适合抗体的抗原修复法的信息。这通常需要最终用户进行一定程度的优化。访问我们的 IHC 方案页面 ,获得更多关于抗原修复法的信息。

 

我应使用浓度多高的一抗?

对于我们注明“稀释度根据实验而定”的抗体,较难找到一个起始点。以下图表根据产品的纯度以及抗体将进行的应用提供了一些供使用的起始稀释度。

未纯化的抗体在数据表中不会注明浓度。对于大多数全抗血清、培养物上清液或腹水产品,浓度尚未确定。未纯化的抗体制品在具体抗体浓度上差异很大。如果给定的未纯化抗体制品的具体抗体浓度未知,可以把下面的“浓度估值”区作为估算依据。请记住这些稀释度和浓度估值仅推荐用作起始点,有必要根据实验结果调整稀释度。

  组织培养
上清液
腹水 全抗血清 纯化抗体

WB / 斑点杂交

1/100

1/1000

1/500

1 ug/ml

IHC / ICC

纯的 - 1/10

1/100

1/50 - 1/100

5 ug/ml

EIA / ELISA

1/1000

1/10000

1/500

0.1 ug/ml

FACS / 流式细胞术

1/100

1/1000

1/500

1 ug/ml

IP

 

1/100 

1/50-1/100

1 - 10 ug/ml

浓度估值

1 - 3 mg/ml

5 - 10 mg/ml

1 - 10 mg/ml

 

 

我应如何保存抗体?

我们建议始终按照数据表上的方法保存抗体。如果没有按照数据表上的说明保存,我们不能保证抗体的性能。

阅读我们的抗体保存指南

 

我应如何分装抗体?

请根据一次实验的常用量进行分装。每等份不应少于 10 µl;每等份的量越少,抗体储液浓度受蒸发和管壁吸附的影响越大。

阅读我们的抗体保存指南,获得更多关于抗体分装的信息

 

为什么这种抗体停产了?我还能得到更多这种抗体吗?

我们有时不得不停产某种产品。导致这种情况出现的原因有很多,比如滞销、货源中断或生产困难。有时可能是质量问题,但并非总是如此。我们理解停产给客户带来的不便,特别是已经使用了一段时间的抗体。当您查找停产产品的数据表时,若可以用另一种替代抗体,我们将提议并提供替代产品的目录号。请经常检查,确保供选抗体适合您的应用和物种。如果不适合,请搜索我们的目录寻找其他适合的替代品。

任何在我们网站列出为不能获得的抗体都已库存售尽,不能再获得该产品。

 

有文献使用过这种抗体吗?

我们一接收到新信息,就会立即更新数据表。所有我们知道的使用特定抗体的出版物将列在抗体数据表的“参考文献”选项卡下。

 

该抗体在其他物种或应用中测试过吗?

所有我们知道的测试过抗体的物种和应用都会在数据表上说明。我们一获取新信息,就会立即更新物种和应用。

如果您决定购买产品用于未测试过的物种应用,我们鼓励您通过在线产品数据表提交 Abreview。我们一直支持客户向我们反馈实验结果(无论结果是阳性还是阴性的),并且使所有产品信息均可供研究人员查阅。我们对发表的每一篇 Abreview 给予 Abpoints 奖励,Abpoints 可以兑换成用于将来购买产品的折扣券或者其他奖品。

查看更多关于 Abreviews 的信息

 

我怎样判断一种抗体是否可以从某个未测试的物种中检测出?

Abcam 不能保证抗体在未测试过的物种中的性能,即使序列比对值很高。决定抗体在其他物种中的结合性的变量有很多。

如果没有其他的选择,并且您觉得有必要考虑购买抗体用于未经测试的物种时,我们推荐您进行免疫原与关注蛋白质的序列比对。可以通过在线数据表上的 Swiss-Prot 蛋白质数据库链接查到序列。很多网站提供计算比对百分率的工具。

访问 EMBL-EBI 网站

输入抗体免疫原序列,将该序列与您想要测试的物种的蛋白质序列进行比对。我们推荐比对值大于 85% 为抗体可进行交叉反应的良好指示。请注意,即使大于 85%,我们仍然不能保证抗体的性能。

 

这种抗体是否会和其他同工型蛋白质或者来源于同个家族的蛋白质起交叉反应?

我们提供了一些抗体交叉反应的数据。请核查数据表上的“特异性”栏。如果这里没有可用的信息,我们推荐您进行免疫原与所关注亚型或其他蛋白质的序列比对。有很多网站提供计算比对百分率的工具。

访问 EMBL-EBI 网站

输入抗体免疫原序列,将其与您想要测试的物种的蛋白质序列进行比对。我们推荐比对值大于 85% 为抗体可进行交叉反应的良好指示。因此我们建议,要使交叉反应不发生,则比对百分率应当远低于该值。

 

你们能提供这种抗体的免疫原序列吗?

你们能提供这种抗体的免疫原序列吗? 联系我们的技术支持团队。  对于公司外部来源的某些产品,免疫原序列是专有资料,即使客户索要,我们也不能发布此信息。

请注意,特异性表位(免疫原中的抗体结合区)基本上不会在市售抗体上进行标记。

 

为什么实际的蛋白质印迹条带大小与预期的不同?

蛋白质印迹是根据大小分离蛋白质的技术。通常,分子量越小的蛋白质在凝胶中的迁移速率越快。但是迁移速率也受其他因素影响,因此观察到的实际条带大小与预期的可能会有差别。常见因素包括:

  1. 翻译后修饰 - 例如磷酸化、糖基化等,这些修饰会增加蛋白质的分子量。
  2. 翻译后剪切 - 例如,很多蛋白质首先合成为前体蛋白,然后剪切形成活性形式,例如半胱天冬酶前体
  3. 剪接变体 - 通过选择性剪接,可实现同一基因产生不同大小的蛋白质
  4. 相对电荷 -氨基酸的组成(带电荷的氨基酸与未带电荷的氨基酸各自所占的比例)
  5. 多聚体 - 例如,蛋白质二聚体。蛋白之间强烈的相互作用会造成条带偏大,但采用还原条件通常可以避免多聚体的形成。

 

什么是克隆号?

克隆号是指定给单克隆杂交瘤细胞产生的抗体的编号。每个杂交瘤细胞克隆产生单个纯同质型抗体。“单克隆”这个术语适用于单个细胞克隆、单个细胞以及这些细胞的后代。单克隆抗体可以在实验室大量制备。

每个克隆号代表用来制造该抗体的克隆自腹水的特定细胞系。因为这些抗体由一个以上宿主生产,所以每个克隆细胞系都有一个唯一的克隆号。克隆号与管形瓶生产相关的批号不同。这些克隆的质量几乎没有差别。

克隆也是指由来自亲本的单一体细胞(非生殖细胞)发育而成的个体,代表该亲本的精确复制品。克隆是一群来源于单一祖细胞的细胞。

 

什么是产品合格证书 (CoC)?

我们的一些抗体由内部生产,其他则来源于我们认为客户会感兴趣的产品的供应商或学术合作伙伴。 Abpromise 保证所有产品都具有高品质。Abpromise保证,如果产品性能与数据表上的描述不同,自购买之日起 120 天内我们提供换货或退款服务。我们某些合作伙伴不具备 ISO9001 认证资格,因此我们不能提供这些特殊产品的分析证书。因为我们合作伙伴的身份是保密的,故我们为产品目录中所有产品提供产品合格证书。这份文件证明我们的产品符合特定产品批号/批次的要求规格。

客户服务技术支持 团队非常乐意应需要为您发送 CoC。