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使用前后,应用 Trigene 消毒剂和 70% 乙醇对安全柜内部进行擦拭。在使用之间也可用紫外 (UV) 灯对安全柜灭菌。
工作区域应保持整洁,仅能放置当前实验程序所需的物品。
放入安全柜内的设备或试剂应预先喷洒 70% 乙醇。
切忌倾倒细胞培养基或其他试剂。应当使用无菌玻璃移液管或一次性塑料移液管来操作液体,并且每只移液管仅使用一次。
尽管许多细胞培养试剂经制造商认证为无菌,但仍有可能在处理过程中受到污染。如有需要应对无菌试剂进行过滤(0.2 µm 过滤器)或高压灭菌。
切忌在不用时将试剂瓶、烧瓶或平皿在超净台内敞开放置。仅在使用前打开容器,并且如果需要将盖子放置在安全柜的表面上,确保开口朝下。尽快更换盖子。
切忌同时打开多个烧瓶、平皿或瓶子,这可能会导致交叉污染。
操作细胞培养物前后务必彻底洗手。
无菌技术可以防止细胞培养物和试剂受到环境中的微生物污染。本视频将概述在细胞培养超净台进行无菌操作所需的步骤。
工作开始前,请确保已经洗手并穿戴了正确的个人防护设备,包括手套、实验服和防护镜。将消毒剂彻底喷洒在细胞培养超净台内,并用纸巾擦干净。
将用过的纸巾扔在合适的垃圾箱里。然后,将 70% 的乙醇喷洒在超净台内,并用纸巾擦干净。现在可以开始使用超净台了。从冰箱中取出细胞培养基和补充剂,放置于 37oC 的培养箱中使其升温。制备培养基时,用乙醇喷洒每一样物品,保证无菌。要迅速高效地操作,尽可能减少污染的风险,将所有试剂瓶放在便于取用的位置。向培养基瓶中加入不同补充剂时使用新的无菌吸头或移液管。仅在使用前打开培养基瓶,若取下瓶盖,请确保开口朝上。手或衣袖不要从打开的培养基瓶上方扫过,因为这可能导致污染。为尽量降低这种风险,用完培养基瓶后立刻盖上瓶盖。
在培养基瓶上标记您的姓名缩写、日期以及内容物详情。