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Question (46706) | Recombinant Dengue Virus 2 NS1 glycoprotein (ab64456)

Buenos días ,
te hago llegar los comentarios de mis compañeros.
We will very much appreciate if you can provide us details on the epitope targeted byab41616 and also if it has been compromised in the his tag region ofab64456 so we can further look at possible alternatives for our system.
Thank you very much for your utmost attention.
Gracias de antemano,

Gracias por tu respuesta.
He consultado esta información con mis compañeros del laboratorio.
La glicoproteína (ab64456) contiene toda la secuencia excepto el dominio transmembranal. Además contiene 2x6 His tags, uno localizado en el extremo N terminal y el otro en el C terminal.
Respecto al anticuerpo (ab41616) me comentan que el dímero del virus Dengue NS1 está presente en las muestras sin calentar (forma sin reducir), y por efecto del calor se convierte al monómero. El epítopo es por tanto conformacional. En cualquier caso imagino que para llevar a cabo el ensayo ELISA no usáis muestras reducidas. Si tenéis la oportunidad os aconsejaría que probarais la combinación de proteína /anticuerpo mediante WB usando las muestras sin reducir, para comprobar si el anticuerpo realmente está detectando la proteína.
El epítopo del anticuerpo no se ha mapeado, por tanto no puedo saber si reconoce el extremo N terminal o C terminal de la proteína donde se localizan los His tags.
En cualquier caso, como no hay más Dengue Virus NS1 glicoproteínas en el catálogo, puedo mandaros de reemplazo otro primario contra la misma, esperando que esta vez si la reconozca. Estas son las alternativas:
http://www.abcam.com/Dengue-Virus-NS1-glycoprotein-antibody-DN1-ab41490.html
http://www.abcam.com/Dengue-Virus-NS1-glycoprotein-antibody-DN2-ab41623.html]
Espero vuestra respuesta para saber cómo proceder y qué solución os podemos dar.

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